紫外可見分光光度計是一種常用的分析儀器,由于使用范圍廣,頻率高,經(jīng)常出現(xiàn)故障。了解光度計的常見問題及處理方法,有助于及時解決問題,保證實驗的順利進行。
1、關(guān)于儀器的預熱
一般分光光度計的操作說明中,要求儀器預熱時間在20分鐘左右;如果是帶微處理器的分光光度計,儀器開機后會自動進入自檢(初始化)狀態(tài),大概需要10分鐘。在分光光度計預熱的過程中,很多用戶或多或少都存在這樣的問題,比如只預熱電路系統(tǒng)(不調(diào)整波長,打開吸收池黑盒蓋預熱等),或者認為初始化過程是預熱等。
對于具有微處理器自檢功能的分光光度計,在儀器自檢(初始化)開始后,在測量窗口上設(shè)置所需的波長值,在吸收池中安裝純化水并放在光路上。調(diào)整“0000A”后,將儀器預熱,當儀器讀數(shù)沒有變化時,再進行測量。
對于紫外可見分光光度計,由于有兩個光源(鎢燈和氘燈),為了延長燈的使用壽命,可以在通電自檢后關(guān)閉測量中不使用的光源燈。
2、波長準確度的檢查和校正
日常使用分光光度計的時候有沒有經(jīng)常檢查波長準確度?答案是否定的,日常測量中儀器靈敏度下降時,要檢查波長準確度。簡單的檢查方法(粗略檢查)是:儀器開啟后,將波長調(diào)至580nm,在吸收池底座的光通道中插入一張白色卡片紙。如果能觀察到矩形黃點,則波長精度在正常范圍內(nèi),否則應進行波長校正。
當儀器被長距離運輸、機械振動或更換燈泡時,必須檢查并校正波長準確度。粗略檢查同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法,使用氘燈的特征發(fā)射線校正法。
3、關(guān)于吸光度測量的重復性
在紫外可見分光光度計的測定過程中,發(fā)現(xiàn)同一溶液在不同的時間有不同的測定結(jié)果,即重復性不好。原因是什么?排除測量誤差的因素,可能的原因有:
?。?)儀器預熱時間不足或預熱方法不正確,應延長預熱時間或采用正確的預熱方法。
?。?)光電轉(zhuǎn)換器(如光電池)的光電轉(zhuǎn)換效率因長期使用而發(fā)生變化。此時標準溶液和待測溶液的吸光度也較低,在相對定量時對結(jié)果影響不大。但對于這類儀器,一般建議連續(xù)使用時間不要超過3小時。如果需要長時間使用,最好間歇使用30min分鐘。